流式细胞仪(FCM)是集单克隆抗体,荧光化学,激光,计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学,生物化学,生物学,肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作.,FCM提供了一种简捷地监测细胞亚群的方法.即通过荧光抗原和抗体检测技术对淋巴细胞膜表面分化抗原(CD分子),细胞分类和各亚群进行分析,并计算出淋巴细胞各亚群的百分比,从而对人体细胞免疫状态进行评估.在某些病毒性疾病的感染血液病,原发性和继发性免疫缺陷病,肿瘤的疗效观察和预后判断以及器官移植的监测上起着重要的指导作用.如正常人群淋巴细胞CD3+CD4+/CD3+CD8+比值大约为2∶1,但在人体细胞免疫力低下时可出现比例倒置.用FCM还可以监测肾移植后病人的肾排斥反应,如果CD3+CD4+/CD3+CD8+比例倒置,病人预后良好,较少发生肾排异现象;
反之排异危险性增加.同样此种测定技术也用于爱滋病的诊断和治疗中.白细胞表面分化抗原的检测:CD3+: T淋巴细胞;
CD45RA:未受刺激(Naive)T淋巴细胞;CD45RO:记忆T淋巴细胞CD3-CD19+: B淋巴细胞CD3-CD16+56+: NK细胞【NK细胞表达众多表面分子,如CD56, CD16, CD57,CD161等,但这些表面标志都不是NK细胞所特有的,只具有相对特异性.通常将CD56+,CD16+,CD3-,TCR-,BCR-的淋巴样细胞认为是NK细胞.以CD56+CD16+,CD56+CD16-和CD56-CD16+为标志将NK细胞分为3个亚群,发现CD56是NK细胞分化的特异性标志,而CD16的表达量与NK细胞的杀伤活性密切相关.在上述研究基础上许多学者主张以CD56的表达密度不同,将NK细胞分为CD56bright和CD56dim两群. CD56brightNK细胞高表达CD56, 低表达CD16, KIR(killer cell immunoglobulin-like receptors, KIR;
表达高亲和力的IL-2 受体.而CD56dim NK细胞高表达CD16,低表达CD56,仅表达中亲和力的IL-2受体. CD56bright NK细胞在IL-2的作用下表现出较强的增殖作用,而CD56dim NK细胞几乎不分泌细胞因子,且IL-2不能促其增殖.CD56dim NK细胞表现出较强的杀伤活性,而CD56bright NK细胞杀伤活性较低且表达一些末成熟标志,可以认为CD56bright NK细胞是未成熟的NK细胞,而CD56dim及NK细胞则相对较成熟,即NK细胞发育可能经历CD56bright NK细胞到CD56dim NK细胞这样一个过程】CD64: 单核,巨噬细胞CD1a,CD83: 树突状细胞CD3+CD4+CD8-:T辅助/诱导淋巴细胞标记(Th/Ti);
CD3+CD4+CD29+:T辅助淋巴细胞诱导亚群标记,辅助B淋巴细胞产生抗体和诱导细胞介导的淋巴细胞溶解作用;
CD3+CD4+CD45RA+:T抑制淋巴细胞诱导亚群,诱导Th的活化和辅助其功能.T辅助细胞还可分成Th1,Th2两个亚群,同时标记细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4,可区分Th1细胞(CD4+/ IFN-γ+)和Th2细胞(CD4+/ IL-4+).CD3+CD4-CD8+:T抑制/杀伤淋巴细胞标记(Ts/Tc);
CD3+CD8+CD28-:抑制性T淋巴细胞;CD3+CD8+CD28+:细胞毒T淋巴细胞;CD3/HLA-DR:同时计数外周血静止T淋巴细胞(CD3+HLA-DR-),B淋巴细胞(CD3-HLA-DR-)及活化T淋巴细胞(CD3+HLA-DR+);
CD25:白细胞介素2低亲和力受体,其中CD3+CD25+为活化T淋巴细胞,CD3+CD25-为静止T淋巴细胞;
CD34,CD38 ,CD117,HLA-DR: 造血干,祖细胞CD59: PNH疾病监测;CD23: IgE低亲合力受体,变态反应病,自身免疫,白血病和肾病综合症等病人PBL中CD23表达显著增加,阳性率与疾病严重程度正相关;
CD44: 肿瘤患者CD44粘附分子与恶性度相关.生活护理:目前FCM用的各种单克隆抗体试剂已经发展到了百余种,可以对各种血细胞和组织细胞的表型进行测定分析。