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指导意见：免疫缺陷病的检查：对所有免疫缺陷病例必须选作一些实验室检查以确立诊断;而在作相应治疗之前通常还须作一些先进试验对疾病作进一步分类(表147-5.一般来说多数机构和医院能作筛查试验多数大医院能作先进试验特殊试验则只有一些实验室或配备高水平免疫学实验室的医院才能进行.当怀疑免疫缺陷时建议进行实验室筛查试验包括全部血细胞计数及分类计数和血小板计数;测定IgGIgM和IgA浓度;抗体功能测定;感染的临床和实验室判断.血细胞计数可发现贫血血小板减少中性粒细胞减少或白细胞增多.应计数淋巴细胞总数如有淋巴细胞减少(1500/μl)提示T细胞免疫缺陷的可能.需作外周血涂片检查是否有红细胞染色质小体(Howell-Jolly)和其他异常红细胞若有提示无脾症或脾功能不良.粒细胞可显示异常形态(如出现Chédiak-Higashi综合征的颗粒.免疫球蛋白浓度测定也属于最先筛查的项目之一但IgD和IgE浓度最初不测.对于免疫球蛋白的解释需谨慎从事因为有显著的年龄性差异;以成人的标准所有2~6个月的婴儿均有低γ球蛋白血症.因此免疫球蛋白浓度必须与同年龄对照组的正常浓度相比较.一般免疫球蛋白浓度在同年龄2SD(标准差)范围内为正常.总免疫球蛋白浓度(IgG+IgM+IgA)600mg/dl或IgG400mg/dl同时抗体功能试验正常者可排除抗体缺陷.总免疫球蛋白浓度200mg/dl常表示明显的抗体缺陷.浓度中度降低(如IgG浓度在200~400mg/dl之间或总免疫球蛋白在400~600mg/dl)没有诊断意义需联系抗体功能试验.抗体筛查试验也被推荐用于初筛.用同种凝集素滴度(抗A和/或抗B)估计IgM抗体功能.除6个月婴儿和AB血型者外其他所有的人均有1:8(抗A)或1:4(抗B)或更高的天然抗体滴度.在某些免疫缺陷(如Wiskott-Aldrich综合征IgG2缺陷)天然抗体和对某些细菌多糖类抗体有选择性缺陷.对免疫过的患者可测定对B型流感菌乙型肝炎病毒风疹病毒破伤风或白喉抗原的抗体滴度以估计IgG功能.出现对一种或几种抗原的适度抗体反应表明无抗体缺陷.最后筛查应包括对慢性感染的检查.红细胞沉降率增加通常与感染程度相一致.应作相应的X线检查(胸部鼻窦)和细菌培养.若所有这些筛查试验均正常则免疫缺陷(特别是抗体缺陷)可排除.但若证实有慢性感染病史毫无疑问或筛查试验阳性则必须进一步作高级试验检查.B细胞(抗体)缺陷的试验只要总免疫球蛋白很低(200mg/dl)就可确立抗体缺陷的诊断其他一些试验仅用于确定具体的疾病和检定有无其他免疫缺陷.如免疫球蛋白浓度和既存抗体滴度低但尚未到消失程度则需测定对一种或多种标准化抗原的抗体反应.对破伤风类毒素B型流感疫苗(测对蛋白质抗原的反应性)或肺炎球菌脑膜炎球菌疫苗(测对多糖抗原的反应性)在免疫前和免疫后3~4周测定抗体滴度以了解接种后反应.如出现异常反应(滴度升高低于4倍)则不论免疫球蛋白浓度如何提示有抗体缺陷.若总免疫球蛋白较低可用荧光抗B细胞特异抗体(如CD19CD20)经流式细胞仪来计算B细胞.正常外周血中淋巴细胞的10%~20%为膜表面免疫球蛋白阳性细胞(B细胞.其次进行血清IgG亚类IgD和IgE浓度测定.IgG1亚类浓度(与IgG相似)与年龄明显有关通常在2岁后IgG1250mg/dlIgG250mg/dlIgG325mg/dl或IgG4测不出可诊断IgG亚类缺陷.在不完全抗体缺陷综合征时常见IgD和IgE异常(两者浓度均降低或升高.IgE增高见于趋化性疾病部分T细胞缺陷变应性疾病和寄生虫病.IgG4或IgE单独缺少无临床意义.某些情况需作其他B细胞缺陷的试验(表147-5.在淋巴结病时或者为了除外恶性肿瘤或感染时可作淋巴结活检(有时需先免疫邻近的肢体.IgG浓度正常或接近正常而有抗体功能缺陷时需作IgG亚类分析.可能存在4个亚类中某一亚类的选择性缺陷.如怀疑有IgG分解加速或经皮肤或胃肠道丢失时则作IgG寿命检查;如病人IgG浓度低下可静脉给予大剂量免疫球蛋白然后每日测定IgG浓度以确定其半衰期.若有严重感染可测分泌物(泪液或唾液)中的免疫球蛋白浓度.还可体外检测IgG合成以及对特异抗原如噬菌体或钥孔血蓝蛋白的抗体反应来确定抗体合成阻断的确切部位.在一些遗传缺陷的疾病经用特殊的实验室试验能发现突变的基因或突变的基因产物(如在X连锁无γ球蛋白血症所证实的Bruton酪氨酸激酶基因)T细胞缺陷的试验持久而极度严重的淋巴细胞减少提示T细胞缺陷.然而淋巴细胞减少并不常见.胸部X线检查是筛查婴儿T细胞缺陷的有用方法.对新生儿特别是在感染或其他能使胸腺变小的应激状况发作前作X线检查如看不到胸腺影像提示有T细胞缺陷.迟发型皮肤超敏反应试验对2岁以上儿童是有价值的筛查T细胞缺陷的试验.可用以下的抗原：流行性腮腺炎抗原念珠菌抗原(1:100)液体破伤风类毒素(1:10)和毛癣菌抗原.几乎所有成人以及大多数免疫婴儿和儿童会对其中一种或几种抗原发生反应于48小时出现直径5mm的红斑和硬结.存在一个或一个以上阳性迟发型皮肤试验通常表明T细胞系统未受损.诊断细胞免疫最有价值的先进试验是T细胞和T细胞亚群(辅助/诱导细胞和抑制/细胞毒细胞)的计数.通常采用T细胞特异性的鼠单克隆抗体经流式细胞仪作检测.应用全T细胞抗体(抗CD3抗CD2)检测总T细胞抗CD4抗体检测T辅助/诱导细胞抗CD8抗体检测T抑制/细胞毒细胞(这些试验已替代羊红细胞花结法计数T细胞.当辅助T细胞(CD4)计数500细胞/μl高度提示T细胞免疫缺陷.CD4计数200细胞/μl则为重度T细胞免疫缺陷.CD4/CD8(辅助/抑制)细胞比值应1.0.此比值倒置也提示T细胞免疫缺陷(在艾滋病CD4/CD8比值降低表示免疫系统进行性受损.单克隆抗体也能有效地检测激活的细胞(CD25)自然杀伤细胞(CD16和CD56)和不成熟的T细胞胸腺细胞)抗原(CD1.测量病人淋巴细胞增殖和增大(转化)能力的另一种有效的先进试验是将有丝分裂原(如植物血凝素刀豆素A)照射过的同种白细胞(用于混和白细胞反应)或病人过去接触过的抗原与淋巴细胞共同培养.在这些刺激之下正常淋巴细胞急速分裂这可用形态学方法或将放射性胸腺嘧啶掺入分裂细胞的方法予以测定.增殖程度通常用指数表示---受刺激细胞的每分钟计数(CPM)与等量未受刺激细胞的每分钟计数的比值.T细胞缺陷病人存在与免疫受损程度一致的增殖应答低下甚至消失的现象.对有丝分裂原(能激活所有细胞)的增殖反应(刺激指数50~100)明显地高于对抗原或同种细胞的反应(刺激指数3~30.还可进行特殊试验测定在有丝分裂原或抗原刺激后淋巴因子的生成.淋巴因子有30多种但通常测定γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-2(IL-2)白介素-4(IL-4)和α-肿瘤坏死因子.部分病人有相应的增殖反应但淋巴因子生成低下[如慢性粘膜皮肤念珠菌病时的移行抑制因子(MIF)缺陷].另一组特殊试验可测定细胞毒功能.使用不同的肿瘤细胞或病毒感染的靶细胞测定不同类型的细胞毒(自然杀伤细胞抗体依赖性细胞毒或细胞毒性T细胞.细胞免疫缺陷可有不同的细胞毒缺损.在某些类型的联合免疫缺陷嘌呤代谢途径的一些酶(腺苷酸脱氨酶核苷磷酸化酶)有缺陷可用红细胞测定.最后还可测定不同的胸腺激素(胸腺素血清胸腺因子)这些激素在某些细胞免疫缺陷时有所减少.HLA分型能有效地检出二群细胞(嵌合体)的存在也可排除HLA抗原的缺陷(裸淋巴细胞综合征.在少数T细胞激活缺陷病可通过T细胞受体完整性和信号传导途径的判断加以确定.吞噬细胞缺陷的试验当病人有确切的免疫缺陷病史而B细胞和T细胞免疫正常时需检查有无吞噬细胞障碍.炎症部位无脓液形成或脐索脱落延迟同时又无白细胞减少这种临床现象提示存在趋化性缺陷.初筛除血细胞计数外还应测定IgE浓度(在许多趋化障碍时IgE会增高)和四唑氮蓝(NBT)还原试验用以诊断最常见的吞噬细胞缺陷---慢性肉芽肿病.NBT试验的原理是粒细胞在进行吞噬和杀伤时其代谢活性增高使无色的NBT还原形成蓝色的甲.慢性肉芽肿病时此种染色变化不出现可用肉眼显微镜或分光光度仪判定.特殊试验中首先做粒细胞染色以测定髓过氧化物酶碱性磷酸酶或酯酶.如这些酶染色试验阴性则需接着做定量测定.其次细胞运动可用Rebuck皮肤窗检测.方法是用解剖刀将皮肤表层刮伤放一块盖玻片于其上然后每隔一定时间更换盖玻片做移动细胞染色.多形核细胞应在2小时内首先大量进入至24小时内为单核细胞所代替.趋化性异常可用体外趋化性试验测定.此法系在特制的趋化性小室(Boyden小室)或琼脂糖平板上观察粒细胞或单核细胞的移动测定细胞朝向趋化性吸引物(如经调理素处理过的酵母多糖)的移动能力.其次吞噬作用还可通过计数分离的粒细胞或单核细胞吞噬胶乳粒子或细菌的情况作检测然后测定杀菌作用.方法是在新鲜血清中将病人的粒细胞与已知量活菌混合然后在2小时内系列定量细菌数目.其他确定吞噬细胞缺陷的特殊试验包括：给予皮质类固醇肾上腺素或内毒素测定粒细胞动员作用;粒细胞酶定量测定(髓过氧化物酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶等);粒细胞氧化产物测定(过氧化氢超氧化物);粒细胞特异蛋白测定[CR3(CD11)粘附糖蛋白磷酸烟酰胺腺嘌呤二核苷酸成分]后者能区分4种遗传类型的慢性肉芽肿型别.补体缺陷的试验补体异常的筛查是测定血清总补体活性(CH50)以及血清C3C4浓度.发现其中任何一种浓度低下时必须接着做经典途径和替代途径的补体滴定和各个补体成分的测定.经典途径成分的缺陷与免疫肾脏疾患血清锡克反应或急性感染有关.作补体成分测定需用单价特异性抗血清或致敏红细胞以及含有待测成分外所有补体成分的溶液.还可用抗血清测定补体调控蛋白;遗传性血管性水肿多伴有C1抑制物缺陷C3分解代谢过盛的C3缺陷伴有Ⅰ因子(C3抑制物)缺陷.测定血清调理活性趋化活性或杀菌活性可作为判断补体功能的间接试验。

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