朋友你好!加热醋酸法:原理是尿液经过加热煮沸后蛋白质变性凝固,加入醋酸使尿pH值接近蛋白质等电点(pI,有利于变性蛋白质沉淀。
并且可消除尿液中某些盐类在加热后浑浊的干扰。 所需试剂为5%乙酸,器材为15mm×150mm的无色透明玻璃试管和酒精灯,小滴管1支。
具体步骤:a.向玻璃试管加入尿液8ml,约占试管的2/3。b.手持试管底部,试管呈60°倾斜,管口朝外,避免对准操作者和其他人员,将尿液上端部分置于火焰上方先轻轻来回移动数下后,固定加热尿液上端,其问凭手腕转动试管。
C.尿液沸腾后,以小滴管加入2~3滴醋酸溶液后,继续加热至沸。 [结果判定]将试管置于黑背景前方,根据白色沉淀的多少和性状,来判断尿蛋白的多少。
加热醋酸法的灵敏度150mg/L。由于尿液中一些盐类在加热煮沸时出现浑浊,加入醋酸后应继续加热至沸,盐类沉淀溶解,蛋白质沉淀依旧保留,并且少量蛋白质只有在加酸后才出现沉淀,因此,操作应遵循加热至沸、加酸、再加热至沸的程序。
加入醋酸量过多或过少,均可使尿液pH值偏离蛋白质等电点,蛋白质不出现沉淀,形成假阴性。若尿中盐离子浓度太低,也会出现假阴性。